FUNDAMENTO
El PT mide el tiempo que tarda en coagular un PPP (citratado)
cuando se provoca la coagulación al añadir tromboplastina hística y Ca+2.
Los factores extrínsecos de la coagulación se activan en
presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado. Se determina el tiempo
de coagulación del plasma después de añadir el reactivo.
- Micropipetas
- Pipeta Pasteur
- Coagulómetro y cubetas
- Tubos Eppendorf
- Muestras citratadas
REACTIVOS: reactivo de trabajo (Casa comercial)
TÉCNICA
1. Preparación de un PPP.
2) Preparar los reactivos:
a) Reactivo de trabajo: Tomamos el vial y añadimos 4 ml de agua destilada (CONSULTAR PROTOCOLO CASA COMERCIAL). Tapamos y mezclamos suavemente hasta disolver el contenido sin formar espuma. Dejar reposar 15’. Estabilidad de 7 días en refrigeración.
b) Control: De igual manera que el anterior con 1 ml de agua. (si lo hubiera)
c) Sacar un pool de PPP y dejar atemperar.
3) Determinación en el coagulómetro:
a) Encendemos el coagulómetro. Calibrar (No). Código: PT
b) Rotulamos las muestras en las cubetas. Añadimos una varilla de acero a cada cubilete.
c) Depositamos con una micropipeta de 100 µl de muestra, control y pool.
d) Atemperamos en el coagulómetro 5 minutos.
e) Ir poniendo las muestras en el punto de medida, tapamos con el capuchón y añadimos 200 µl del Reactivo. Se medirá automáticamente el tiempo.
Las muestras de cada paciente hay que determinarlas dobles y no debe haber más de 1-2 segundos de diferencia en la medida.
CÁLCULOS
Los valores se pueden expresar en segundos, en tasa de PT, o en INR.
%=TP
paciente/TP control*100
%= 17,9 / 25,6*100 = 69.9 %
INR= (17,9 / 25,6) ^ 1,57 = 0,57 seg
Valores normales:
• PT
(segundos) 13-17 seg
• PT
(porcentaje) 70-120%
• PT (Tasa) 0’7-1’2
OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES
Los resultados de esta práctica no fueron buenos, en muchas muestras el coagulómetro tan siquiera se paraba y en otras ocasiones lo hacía en valores que estaban muy fuera de lo normal.
Hay que tener en cuenta que las muestras utilizadas contenían EDTA y no citrato como indica la práctica, por lo que es muy probable que los resultados erróneos se deban a este motivo.
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